1 材料H B s A g 、抗H C V 试剂;为厦门新创科技公司生产,临界值血清:卫生部临床检验中心免疫质控实验室提供,酶标仪:奥地利生产Classic S 、科软洗板机、深圳科软科技生产,C o l u m b u s。
所有检测均严格按照说明书进行操作。对于抗-HIV E L I S A法初次检验的阳性标本进行双孔复检,复检仍呈阳性者送省疾病控制中心艾滋病实验室确诊。梅毒阳性者用T P P A 确认。仪器为美国D Y N A T E C H M R5 0 0 0酶检测标仪、科软全自动洗板机和加样器。
鉴于以上所述,FAME全自动酶免分析系统目前依然是全国血站系统实验室的主导设备,对于ELASA常规项目的检测具有重要意义。FAME全自动酶免分析系统全部采用电脑控制,自动加试剂、自动孵育、自动洗板、自动出结果,是精密度很高的仪器,任何不符合试验条件的因素都导致试验不能继续运行或使试验失败。
常采取洗板机与人工洗板相结合的方法:即应用洗板前先甩干每个孔内的反应物,再用洗板机清洗4 ~ 5次,然后用简易洗板器具在各孔内充满清洗液,应用1 ~2 min,再甩干洗液,最后用吸水纸充分拍干板内洗液,再加显色剂显色。实践证明,反应板非常洁净,不留任何非特异反应的干扰物质,反应结果也可靠。
仪器与试剂:BHC-1300IIA/B3 二级生物安全柜、可调式微量移液器、3 7 ± l t电热恒温水温箱、科软全自动洗板机、Multiskan Mk3全自动双波长酶标仪及酶联免疫法检測丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)诊断试剂盒。
自动酶标洗板机具有自动化程度髙,污染小,洗涤时间、次数、浸泡时间自动控制等优点。但我们在使用中发现有些不足之处:第一,在洗板与冲洗管路时,洗液瓶盖与蒸馏水瓶盖互换不如改用三通方便。
封盖后,用托盘平移至温箱孵育;洗涤、溢出洗板机使用前应检査洗液针孔是否阻塞,如发现阻塞应尽快疏通,在洗涤过程中要注意洗涤液不能溢出;每次洗涤完毕,用蒸馏水洗涤几次,以免洗涤液中的成分产生结晶阻塞针孔,造成实验室环境污染。(注:使用KR洗板机将可避免其中很多麻烦)
洗板原因:(1)洗板机针头堵塞,吸不干净,导致洗板不好而致花板;(2)准确配置洗液浓度,使用专项厂家的试验用洗液,不要混用;(3) 反应板过多造成洗板等待时间长。
洗板机和酶标仪一样种类多。评价洗板机的优劣,要着重考虑排液残留量,是否存在交叉污染及洗板程序的灵活性,性能与价格比、售后服务等,尽管全自动酶标系统(内質洗板)逐步推广,但洗板机对中小型实验室不可缺少的仪器之一。
洗板环境实际上是一组有利于改进洗涤效果的参数及洗涤动作。对丁-具体应用来说,有的很实用,效果也不错,如底部冲洗、两点吸液、震动、交叉吸液(漂洗)等。精心设计的洗板条件确实可以取得很好的洗涤效果。
合理的软件设计对于自动洗板机系统各个功能的实现起宥非常要的作用,软件的可靠性也成为洗板机稳定运行的必要条件。本系统的软件设计中,采用单片机C 语言进行软件设计。
包括:放射免疫测定仪、酶免疫分析仪、自动酶标仪、自动免疫比浊仪、化学发光免疫分析仪、电化学免疫分析仪、时间分辨荧光免疫分析仪、荧光偏振光免疫分析仪、蛋白透射浊度仪、蛋白散射浊度仪、免疫浊度仪、流式细胞仪。
酶联免疫分析法(ELISA) 是食品分析、临床检验中的一种常用方法,具有操作简便、成本低廉、易于实现自动化等优点。进行ELISA分析时,通常包含多次洗板过程。以常用的“三明治”分析方法为例,分析时首先在包被有抗体的酶标板中加人待测样本,孵育后洗掉样本溶液并加入酶标记的第二个抗体继续孵育。然后洗掉第二个抗体,加人酶的底物。
将酶标仪托盘罝于滑道t ,并使预洗槽处于后部的清洗头的下方,按“PRIME” (预洗)键,淸洗头将上下运作向预洗梢注人吸出,最终停在下方位畀,当“PRIME”指示灯持续亮起时表明预洗功能巳经完成。
高故障可以说是传统洗板机无法跨越的鸿沟。特别是堵针,可以说是洗板机世界性难题。为解决这个难题,公司组织进行了近三年的研发,投入了大量的人力、物力。由于要实现以下功能的原因,我们的价格要高一些:1、残留量接近0,实现免拍板。 2、正常使用不堵针。
而传统洗板机是这样的,可以对比一下:垂直运动的功能足通过第二、三电动机分别带动复合淸洗头A 和B 部分在垂直方向上运动,并且通过垂直红外传感定位系统检测和控制其精确运动到指定微孔内进行洗板操作。具体的结构设计如下所述。
洗板是E L IS A 实验[1]中必不可少的重要操作步骤。E U S A实验要求有一个稳定和有效的洗板过程,没布完成洗板则无法进行下一步的操作:洗板不稳定必将造成试验结果的波动甚至失败。但是FI前国内许多医疗单位使用的全自动洗板机均是同外公司生产的,
自动洗板机是进行酶联免疫实验时,检测各种感染性病毒所必铪的设条之一,其作用是通过淸洗,实现酶联免疫实验过程中结合相游离相的分离。当前,酶标洗板机广泛应用于医疗卫生单位、卫生防疫站、血站及各种生物实验室的ELISA法的洗涤T.作。其貝.有精密、可靠、自动、带有液面感应报警系统、防止溢流、操作简便等特点。
KR洗板机做过的实验项目(部分)表明,仿手工甩干式洗板机是迄今为止最好用的洗板机。 1 乙型肝炎病毒e抗原诊断试剂盒(酶联免疫法)HBeAg 2 乙型肝炎病毒表面抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)HBsAb
给仪器注人蒸馏水,抬起清洗头,用戊二醛溶液注满托盘预洗槽。( 3 ) 用清洗头抽干托盘预洗槽,再用蒸馏水注满托盘预洗槽,抽干。( 4 ) 移走酶标板架和清洗头,将它们浸泡在戊二醛溶液中24h。