酶扩大免疫测定技术是最早取得实际应用的均相酶免疫测定方法,是由美国S y v a公司研究成功并定名的。此法主要检测小分子抗原或半抗原,在药物测定中取得较多应用。酶扩大免疫测定技术(enzyme multiplied immunoassay technique,EMIT)试剂盒的商标取名为EMIT 。
当一个试剂盒拿到我们手中的时候,最初的质检步骤就是观察其内外包装,看是否有效期已过,试剂瓶是否漏液,真空包装是否破损,试剂是否齐全等等,然后我们再采用下述方法来判断它的内在质貴。
由于硝基呋喃类药物在体内很快就能被代谢,而在组织中结合的代谢产物则能存留较长的一段时间,所以在分析此类药物的残留时通常分析其代谢产物,从而就可以检测其代谢产物为手段达到检测硝基呋喃类残留的目的。
单波长微板速率法的评价A L T测定方法的规范化、一致化、 标准化始终是人们 努力的方向。1985 年国际临床生化联合会(IFCC)为提高酶测定试验的准确性和精密度, 使试验结果具有可比性,提出了 A L T 测定推荐方法。无论从操作手段的标准化程度,方 法的灵敏性、 稳定性, 还是结果判断的科学性、准确性, I F C C推荐方法均优于血站行业使 用的赖氏法和酮体粉法。
在E L I S A加样步骤中,应将所加物加在E L I S A板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。
选择强阳性对照的A 值为0. 8 左右、阴性对照的A 值小于0. 1 的包被抗原的稀释度作为工作浓度。表1-1为本例的测定结果,表中数字为A 值。从表1-1中可见1 : 2 0 0为最适合的工作浓度。
补体补体可和IgG的Fc段结合均可造成E U S A 和金标法假阳性,由于补体不稳定易失活,因此检测的样品最好放在4 尤冰箱1 ~2 d,这样的H B V 假阳性明显减少。但样品也不宜放置时间太长,否则易产生二聚体或多聚体,又可造成抗- H C V 假阳性。
当胶体金标记抗体用于免疫组织化学定位和用于电镜水平的免疫组织化染色时,标记抗体的金顆粒,51沉于相应抗原处。除主要用于免疫组织化染色外,还可利用金溶胶在免疫凝聚试验时作为载体,金溶胶的光敢射性与溶胶颗粒的大小密切相关,一旦颗粒大小发生变化,光散射也随之发生变化,
血清盘中应包含与该项检验相关的病种样本和已知具有干扰物质(R F 因子)的样本,以检验试剂的特异性。
到2 0世纪7 0年代,实验室质量控制进人一个新的阶段,即全面质量管理(Good Laboratoryftactice,GLP)0 进人2 0世纪8 0年代末期,GLP的统一标准产生了,发展到“认证实验室”管理阶段。
各孔均显色的可能原因①由于包被不全,固相载体表面上的残留空白非特异地吸附丫酶结合物;②_ 结合物浓度过高;③加酶结合物后洗涤不彻底;④底物浓度过高;⑤底物不纯或底物被酶污染。
转基因动物(transgeni.- animals ) 是指将巳知的外源基闪梢入动物受体的生殖细胞或胚胎中,使动物受体的染色体基因组整介有外源基因并能遗传给后代的动物转丛因动物技术(transgenic animal lechniques) P.要分为显微汴射技术、反的# 病相载体技术.胚胎干细胞(ES细胞)技术7 种
分析与讨论i寸论是从实验和观察的结果出发,合理地、综合性运用专业知识从理论上对其分析、比较、阐述、推论和预测: 分析是从理论上对实验结果的各种资料、数据,现象等进行综合分析;解释.说明实验结果;
由于在医学相关的建模中,人们总是希望能够把目前已了解的医学相关知识及机制与建模的过程相结合,得到更准确的数学模型,因此,机制分析方法更为常用。下面给出了机制分析法建模的主要步骤。
目的性原则科研选题要有明确的目的性,即明确、具体地提出要解决的问题。尽量选择在医药卫生保健事业中有重要意义或迫切需要解决的关键问题,最好集中解决1~2个问题:题目切忌笼统模糊、包罗万象,
文献综述是了解过去、展望未来的资料,掌握某一方面知识的良好途径;有助于启发思路,为选题和设计提供线索;有利于提高独立工作能力和科研能力。
培养观察的良好心理品质:这包括①良好的注意品质(注意广度、注意稳定性、注意集中、注意分配);②形成浓厚的观察兴趣;③加强心理活动协同性。
实验基础医学(experimental preclinical medicine)是运用实验仪器、设备和.T具等手段,在人为控制条件下研究机体的结构组成、功能代谢、疾病发生、发展过程以及药物和机体相互作用规律的科学,是一门与多个学科密切联系的综合性医学基础实验科学。
保证待洗的微孔条与微孔板架接触牢靠,使孔边缘髙度一致,不要过髙,以免造成吸液针损伤;微孔不足整条的应补孔,以防洗涤时洗液外注,浸湿洗板机。
仪器= 1996年组是手工洗板,肉眼人工判别结果。2011年组使用深圳科软科技的仿手工帅干式全自动酶标洗板机洗板。试剂:上海科华生物工程股份有限公司E U S A两对半试剂盒,严格按照试剂说明书操作。