深圳科软KR仿手工甩干式离心式洗板机之反应条件的选择

       科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言，其最大特点是：1、不用人工拍板；2、不会堵针；3、故障低；4速度快。

       不吸液：删除吸液针等吸液系统，利用旋转和重力去液。

       无污染：水平放板，旋转向下甩液，保证最大程度去液。独特锅底状接液设计，极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板：微孔内无残留，洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔：无吸液针，极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理，实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗，避免结晶堵塞。开关机自动维护，保证管路内畅通无阻。

       不撞针：注液针不移动，与微孔板保持足够距离，有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗：每块板可以任选条数进行清洗，节省洗液，保护环境。

       速度快：一次可洗1—6块板，KR306洗好6块板约4分钟。

       在建立某一 E L I S A测定中，应对包被抗原或抗体的浓度和酶标抗原或抗体的浓度予以选择，以达到最合适的测定条件和节省测定费用。下面以间接法测抗体和夹心法测抗原为例，介绍最适工作浓度的选择方法。
(一）间接法测抗体
1. 酶标抗抗体工作浓度的选择
       ① 用100 n g / m L人I g G进行包被，洗涤。
       ② 将酶标抗人I g G用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中，保温、洗涤。
       ③加底物显色。加酸终止反应后，读取吸光度（A ) ，绘制曲线。读取A 值在1 . 0时的酶标抗体稀释度，作为酶标抗体的工作浓度。该酶标抗人I g G的工作浓度应为1/1 60 0。
2. 棋盘滴定法选择包被抗原工作浓度
       ①用包被液将抗原作一系列稀释后进行包被，洗涤。

       ②将强阳性参考血清、弱阳性参考血清和阴性参考血清用稀释液作1 : 1 0 0稀释，加样,保温，洗涤。
       ③加人按工作浓度稀释的酶标抗人I g G抗体，保温，洗涤。
       ④加底物显色。加酸终止反应后读取A 值。
       ⑤选择强阳性对照的A 值为0. 8 左右、阴性对照的A 值小于0. 1 的包被抗原的稀释度作为工作浓度。表1-1为本例的测定结果，表中数字为A 值。从表1-1中可见1 : 2 0 0为最适合的工作浓度。

(二）夹心法测抗原在夹心法

       E L I S A法中可用棋盘滴定法同时选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度，举例如下（见表1-2)：

       ①抗体免疫球蛋白用包被缓冲液稀释至蛋白浓度为10 f.g/mL.1 fzg/mL和0. 1 fxg/mL,分别在E L I S A板上进行包被，每一浓度包括三个纵行，洗涤。
       ②在一个横行各包被孔中加人强阳性抗原液，另一横行加人弱阳性抗原液，第三横行加人阴性对照液，保温，洗涤。
       ③将酶标抗体用稀释液稀释成三个浓度，例如1 : 1 0 0 0、1 : 5 0 0 0和1 : 25 000。分别加人每一包被浓度的一个纵行中，保温，洗涤。④加底物显色。加酸终止反应后，读取A 值。
       ⑤以强阳性抗原的A 值在0. 8 左右、阴性参考的A 值小于0. 1 的条件作最适条件，据此选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。从表1-2可看出包被抗体浓度可选用1 M g / m L ,酶标抗体的稀释度可选为1 : 5 0 0 0。为了进一步节省试剂，可以此浓度为基点，缩小间距再做进一步的棋盘滴定。