深圳科软KR仿手工甩干式全自动酶标洗板机之影响ELISA测定结果的因素有哪些？

     科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言，其最大特点是：1、不用人工拍板；2、不会堵针；3、故障低；4速度快。

       不吸液：删除吸液针等吸液系统，利用旋转和重力去液。

       无污染：水平放板，旋转向下甩液，保证最大程度去液。独特锅底状接液设计，极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板：微孔内无残留，洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔：无吸液针，极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理，实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗，避免结晶堵塞。开关机自动维护，保证管路内畅通无阻。

       不撞针：注液针不移动，与微孔板保持足够距离，有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗：每块板可以任选条数进行清洗，节省洗液，保护环境。

       速度快：一次可洗1—6块板，KR306洗好6块板约4分钟。

     E L I S A 即酶联免疫吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。E L I S A 方法被广泛用于各种抗原抗体的测定，能够排除大部分具有血液传播疾病的献血者，但仍有部分具有传染性的献血者不能排除[1]。一些处于窗口期的病毒携带者或试剂盒的差异（如不同厂家的试剂所包被抗原片断不同（或实验室检测的误差（如判断结果的方法和检测板中空白设置等）因素，均可影响E L I S A 检测结果，为防止假阳性结果和假阴性结果的出现，以溶血是否影响E L I S A 检测结果，对3 6 1份样本进行H B s A g、抗H C V 检测分析，报告如下。

      1 材料和方法
      1 . 1 材料H B s A g 、抗H C V 试剂；为厦门新创科技公司生产，临界值血清：卫生部临床检验中心免疫质控实验室提供，酶标仪：奥地利生产Classic S 、、深圳科软科技生产，C o l u m b u s。1.2 方法溶血样本的配制 3 1 6份抗凝血样本，离心2000r / m i n，时间3 m i n，将血浆与红细胞分开，再用该血浆与红细胞按不同比例配制成红细胞浓度为1：、2 % 、4：、8：、12% 、1 6 % 、2 3 % 、30：8 个不同浓度，然后放-20°C冰箱过夜，取出自然溶化，反复冻融，使红细胞彻底破裂，即得不同浓度的溶血样本，非溶血样本3 1 6份，这些样本严格按照试剂盒说明书操作，质控血清加双孔检测，取其平均值，用酶标仪双波长（450/630n m )测定各孔O D 值2 次' 取样当天，同时检测同一份标本的非溶血和溶血样本的H B s A g、抗H C V 。

       2 结果
       2. 1 3 6 1份溶血与非溶血样本H B s A g、抗H C V 的检测结果吸光度值（O D 值）见表1。

       通过实验发现90. 2 % (285/316)的溶血标本O D 值高于相对应血浆样本的O D 值，其O D 值与其对应血浆样本的溶血程度加大而增加。
       2. 2 假阳性问题实验结果显示，溶血可以使样本O D 值增加，不同程度的溶血对H B s A g 抗H C V 测定的影响，各系列溶血样本与对照血浆样本按试剂说明书进行测定，结果显示，不同红细胞浓度溶血样本，由低浓度到高浓度，抗H C V 的吸光度变化不明显，而从H B s A g 检测的吸光度值分析，红细胞溶血浓度由低到高与吸光度值成正比关系，红细胞溶血浓度>2 0 % ，可导致假阳性结果。

       3 讨论
       预防输血后肝炎的关键是对献血者进行抗H C V 、H B s A g等传染病毒的检测、检测结果的可靠性与所用试剂的敏感性和特异性、试验操作和留置血样等因素有关，假阴性的检测结果有可能引起输血者输血后患上传染性肝炎，在对献血者集中大批量抽取样本时，由于各种因素的影响，难免出现少数溶血样本。以上实验表明溶血样本对抗H C V 检测结果分析，吸光度值无明显影响，对溶血样本的测定结果为阴性，无阳性结果漏检的危险，而测定结果为阳性时溶血引起O D 值升高比绝对值较小，可以认为一般溶血并不影响抗H C V 测定结果的判断，溶血样本对H B s A g 检测结果的影响，红细胞溶血浓度低，影响检测结果的O D 值也较低，红细胞溶血（％ )浓度与影响检测结果的O D 值成正比关系，红细胞溶血（％)浓度越高，影响检测结果的O D 值也越高，可出现假阳性结果，检测H B s A g 的方法为先加1 0 0 / D血清样本，样本量较大。因为溶血的样本，血红蛋白与聚乙烯板竞争性结合，血红蛋白本身具有过氧化物酶的作用，当加入底物显色剂时可催化底物显色。抗H C V 由于先加稀释液(100 /D)，且本身加样量小（ /D)，这样经过2 0倍稀释后的血红蛋白很难被竞争吸附到聚乙烯板上，所以溶血样本对抗H C V检测结果无影响，对H B s A g 检测结果有影响。在E L I S A 检测用的标本，最好还是用不溶血的标本，以保证检测结果的质量。