据南京巴傲得生物科技有限公司2013年12月12日15:00最新数据分析：质粒构建载体怎么制作?南京巴傲得最专业的研究医师为您亲自制作。巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、、最先进的、抗体定制供应商、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售，致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:***
质粒提取第一个办法 ，如果你有这个载体的通用引物，可以用这俩通用引物做PCR，然后电泳观察条带的大小，如果条带和你的mRNA的大小相近（应该是略大于mRNA的，因为带有了小部分的载体序列），那就说明这里边是插入目的基因的。第二个办法，如果你能知道这个基因插入位点的酶切位点是什么的话，可以做双酶切来做鉴定，之后跑电泳看切出来的条带大小是否符合，注意如果切得完全的话应该是两条带，后边较大的是载体，前边的是你的mRNA。如果没有通用引物但是有这个mRNA的两端引物，有人可以用这俩引物来PCR，但是这个方法不推荐，因为可能有没连接进去的rna污染会出现假阳性，因此一般还要配合酶切鉴定。
获得目的基因后一般需要将目的基因连接到质粒载体上，在引物上加酶切位点可以使后续的连接过程简单、可控。因为可在载体和目的基因上酶切产生相同的切口。也有不需要加酶切位点的T载体，但连接过程效率不高还会有反向的错误连接。
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