IHC试剂盒研发中心【巴傲得】,之间成为行业最知名的生物公司

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IHC 试剂盒(带DAB显色液)是基于聚合物技术的新一代免疫组化非生物素检测系统。它通过将多个抗鼠和抗兔的IgG分子与多个辣根过氧化物酶标记到同一大分子骨架上形成聚合物。所形成的聚合物直接与一抗结合，从而简化了传统三步法IHC的实验步骤，同时还有很好的信号放大功能，其信号放大功效比生物素-链霉亲和素系统更高，操作更简便。而且非生物素系统避免了内源性生物素产生非特异反应，从而有效的降低背景，特别适合生物素含量较高的组织细胞免疫组化实验；DAB显色液含有辣根过氧化物酶（HRP）催化反应所需的所有试剂，适用于免疫组化中的组织切片、细胞爬片的染色。辣根过氧化物酶可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为褐色的化合物，可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。

①确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。

②确认所有的试剂是否按正确的顺序滴加，是否孵育了足够的时间。 

③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一

抗匹配。如，一抗是兔来源，一定要用抗兔的二抗来匹配；或一抗是羊来源，必

须用抗羊的二抗来匹配。

④检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液是否正确。一抗的稀释液不能用来稀释二抗。

⑤检查抗体的有效期和保存条件，尤其是标记了酶或荧光素的抗体。不要与挥发性有机溶剂一起保存，以免降低抗体的效价。要求冷冻保存的抗体，尽量避免反复冻融。

⑥检查标本的储存条件，最好用已知阳性的标本做阳性对照

⑦检查色原底物溶液，最简单的检测方法是将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中，如果底物发生预期的颜色变化，则可排除底物的因素。需要注意的是，有些底物在制成工作液后应在一定时间内用完，否则会失效。

⑧检查复染剂和封片剂和所使用的显色剂是否匹配。

⑨检查抗原处理方式是否正确，有些不正确的处理方式会破坏染色。如：Collge Ⅳ只能用酶消化，热修复会破坏染色

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