贵阳除垢剂设备供应分享废水强化处理的方法

分享废水强化处理的方法
    培养基

对文献[21]所提供的无机盐培养基配方进行改良，在微量元素储备液中去掉NiCl2 ·6H2O和CoCl2 ·6H2O，改良的喹啉无机盐培养基配方如下： Na2HPO4 4.26 g，KH2PO4 2.65 g，MgSO4 ·7H2O 0.2 g，CaCl2 0.02 g，MnSO4 ·7H2O 0.002 g，微量元素储备液1 mL(主要成分： FeCl2 ·4H2O 1.5 g ·L-1，CuCl2 ·2H2O 0.002 g ·L-1，MnSO4 ·7H2O 0.1 g ·L-1，Na2MoO4 ·2H2O 0.024 g ·L-1，ZnCl2 0.006 g ·L-1，H3BO3 0.07 g ·L-1)，去离子水1000 mL，pH=7.0. 灭菌后加入一定量喹啉(0.22 μm微孔滤膜过滤)作为菌种生长的唯一碳源和氮源.

LB培养基： 酵母膏5 g，蛋白胨10 g，NaCl 10 g，琼脂粉10 g，蒸馏水1000 mL，pH=7.0.
    菌种的筛选分离

将采集的活性污泥样品加入无菌水中，在30℃、 150 r ·min-1的摇床培养箱中培养24 h，静置后取10 mL上层清液接种于90 mL LB培养基中培养24 h; 然后以喹啉为唯一碳源和氮源，按10%的接种量将培养液转接至无机盐培养基上进行反复驯化. 喹啉溶液的初始浓度为50 mg ·L-1，以50 mg ·L-1梯度逐渐增大喹啉浓度至1000 mg ·L-1，筛选可以在改良的喹啉无机盐培养基上进行生长的菌落，经平板划线法分离纯化得到纯菌落.
    实验菌源

喹啉降解菌DQS-01： 从某焦化厂污水处理系统曝气池活性污泥样品中筛选. 苯酚降解菌D2： 本实验室分离筛选的高效苯酚降解菌，经鉴定为睾丸酮丛毛单胞菌Comamonas testosterone[20].
    菌种鉴定

形态学观察. 将最终筛选得到的纯菌落划线接种于LB 固体培养基，30℃ 倒置培养24 h，观察菌落形态; 挑取菌体进行革兰氏染色，用荧光倒置显微镜(LEICA DMI400B)观察菌体形态特征.

生理生化实验. 参照文献[22]进行实验并对菌种进行鉴定.

分子生物学鉴定. 菌种的分子生物学鉴定由大连TaKaRa生物工程公司完成，通过对该菌株的16S rRNA基因进行扩增后对扩增产物进行测序，得到的序列与GenBank数据库中的类似序列进行Blast比对，从而确定其分类地位.
    环境因素对DQS-01菌降解性能的影响

挑取纯培养菌落接种于500 mL LB培养基中过夜培养，使菌体活化及增殖. 将该菌液4000 r ·min-1下离心，沉淀用无菌水清洗3次以去除表面杂质，再转移至无菌水中制备成一定浓度的菌悬液(生物量为150 mg ·L-1左右). 按一定的接种量加入到喹啉无机盐培养基(喹啉初始浓度为300 mg ·L-1)中，在不同摇瓶转速、 初始pH、 温度下振荡培养. 每组实验做三组平行试样，以未加菌的喹啉在同等条件下作为空白对照.
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