据南京巴傲得生物科技有限公司2013年12月27日17:00最新数据分析：质粒构建是如何提取的?质粒构建要哪些步骤,巴傲得专家来总结。巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、、最先进的蛋白表达、、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售，致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:***
构建载体就是把目标DNA、载体、DNA连接酶、酶的buffer放到一起，然后4度连接过夜就行了。上面各个东西的用量，你可以参考连接酶的说明书。如果你是想连T载体的话，就可以直接拿PCR产物和载体连，如果是想做表达载体的话，你还要把目标DNA和载体进行酶切回收后，才能连。质粒提取的方法一般用碱提法，去网上搜下，有很多的。或者买试剂盒提（试剂盒大部分也是碱提法的）。
如果是需要把一个特定的基因片段扩增后，插入到载体上构建质粒，则要根据载体上多克隆位点带有的酶切位点，在自己的目标基因片段上下游都分别设计一段序列，并在设计的序列中引入载体上的酶切位点。这个时候设计出来，用于完成PCR扩增，并能够在目标序列上下游都引入酶切位点的两段序列就叫做质粒构建引物。这样扩增获得的目标片段两端就带有了酶切位点，经过酶切后，与同样经过酶切的载体就可以连到一起，形成环状，完成质粒的构建。
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