据南京巴傲得生物科技有限公司2013年10月8日15:00最新数据分析:南京专业质粒构建中心【巴傲得】制作质粒构建采用国际一流技术。巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、、最先进的蛋白表达、、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:***
阳性标准分子应与转基因作物的快速发展同步提高。中国农业科学院的Xiumin Wand与其他科学家一起开发了一个阳性质粒,带有来自转基因大豆、玉米和棉花的十个靶目标。这个质粒是在pTLE8基础上开发的,而pTLE8含有来自转基因大豆和棉花的8个靶目标。研究组利用重叠延伸PCR技术,将Bt176G3'、MON810G3'和玉米内源性Hmg基因的三个目标片段融合到一个890bp的片段中。然后在质粒pTLE8中用新的融合片段替换CP4 EPSPS基因的位置,从而产生了一个名为Ptle10的,来自转基因大豆、玉米和棉花的、带10个目标基因的新质粒。新质粒有效性的检测结果显示,该质粒能够用于鉴定玉米,还可用于不同转基因作物成分管理鉴定方法的开发。
质粒构建一个人工miRNA前体主要通过over-lapping PCR技术来实现,这通常需要四个PCR反应才能产生最终的人工miRNA前体结构。这种技术有三个缺点:(a)过多的PCR反应步骤增加了碱基突变的可能性;(b)过程费时费力;(c)不适合批量操作。为了改进该技术,中科院西双版纳热带植物园植物分子生物学组研究人员梁岗博士和余迪求研究员等人成功质粒构建了两套人工miRNA载体(pAMIR395a和pAMIR319a),这两个载体包含了天然miRNA前体的5'和3'区域。研究人员可以通过一个PCR反应以产生相应的人工miRNA发夹区,然后通过酶切连接的方式克隆到相应的人工miRNA载体,从而产生所需的人工miRNA前体。
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