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IHC试剂盒供应商最专业的生物制作采用国际一流技术,南京唯有巴傲得

发布于 2013年09月29日

[摘要]IHC试剂盒供应商最专业的生物制作采用国际一流技术,南京唯有巴傲得。巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒供应商、质粒构建、最先进的蛋白表达、抗体定制供应商、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:***

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DAB是显色用的,DAB是HRP的底物,发生显色反应。SP试剂盒是做IHC时用来起放大作用的,试剂盒内含有生物素化二抗、酶联链霉亲和素,一抗孵育完以后,孵育生物素化二抗,然后孵育链霉亲和素,放大阳性染色的效应,最后用DAB试剂盒来显色检测。有的公司的SP盒子里就含有了DAB试剂盒的成分的。

它的原理是在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来。IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A”特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,IHC试剂盒beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。实验最需要注意点就是抗体的性质。抗体不同和抗原结合能力也不同,免染能结合未必能用在IP反应。建议仔细检查抗体的说明书。特别是多抗的特异性是问题。其次,要注意溶解抗原的缓冲液的性质。多数的抗原是细胞构成的蛋白,IHC试剂盒特别是骨架蛋白,缓冲液必须要使其溶解。为此,必须使用含有强界面活性剂的缓冲液,尽管它有可能影响一部分抗原抗体的结合。另一面,如用弱界面活性剂溶解细胞,就不能充分溶解细胞蛋白。即便溶解也产生与其它的蛋白结合的结果,抗原决定族被封闭,影响与抗体的结合,即使IP成功,也是很多蛋白与抗体共沉的悲惨结果。再次,为防止蛋白的分解,修饰,溶解抗原的缓冲液必须加蛋白每抑制剂,低温下进行实验。每次实验之前,首先考虑抗体/缓冲液的比例。抗体过少就不能检出抗原,过多则就不能沉降在beads上,残存在上清。缓冲剂太少则不能溶解抗原,过多则抗原被稀释。

 

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